1. Рекомбинантная плазмидная ДНК рВК415, кодирующая полипептид с последовательностью тканевого активатора плазминогена человека, имеющая размер 11383 п.о., с физической картой, представленной на фиг.4, и состоящая из следующих элементов:- оптимизированной последовательности, кодирующей полипептид тканевого активатора плазминогена человека, SEQ ID NO: 2,- MAR - области прикрепления к ядерному матриксу гена лизоцима птиц,- усилителя транскрипции вируса CMV,- внутреннего сайта инициации трансляции IRES вируса энцефаломиокардита,- гена DHFR мыши,- сигнала полиаденилирования вируса SV40,- аминогликозид-3'-фосфотрансферазы, обеспечивающего устойчивость штамма клеток-продуцента к генетицину (Neo),- кассеты для экспрессии в клетках бактерий гена β-лактамазы, обеспечивающей устойчивость к ампицилину,- уникальных участков узнавания следующих эндонуклеаз рестрикции: AhdI (7352 п.о.), AsiSI (508 п.о.), BglII (2649 п.о.), BipI (2079 п.о.), BmtI (654 п.о.), BssHII (5778 п.о.), BstBI (6062 п.о.), BstEII (2388 п.о.), Bsu36I (2245 п.о.), EcoRI (10035 п.о.), EcoRV (10969 п.о.), FspAI (2020 п.о.), МluI (2433 п.о.), MreI (2220 п.о.), NheI (654 п.о.), NotI (3918 п.о.), PspXI (3342 п.о.), RsrII (5896 п.o.), SfiI (5133 п.o.), SgrAI (2220 п.o.), StuI (5184 п.о.), Tth111I (5496 п.о.), XhoI (3343 п.о.).
2. Линия клеток Cricetulus griseus CHO 1F8 - продуцент рекомбинантного тканевого активатора плазминогена человека, полученная путем трансформации линии клеток Cricetulus griseus CHO DHFR - рекомбинантной плазмидной ДНК рВК415 по п.1.
3. Способ получения и выделения полипептида, обладающего активностью тканевого активатора плазминогена, включающий культивирование линии клеток по п.2, где для экспрессии указанного полипептида культивирование проводится в перфузионных условиях в присутствии смеси, состоящей из добавки CHO Bioreactor supplement и бутирата натрия или диметилсульфоксида, и выделение полипептида, обладающего активностью тканевого активатора плазминогена.
4. Способ по п.3, где в составе смеси используется 0,5-1,5 мМ бутират натрия или 1% (V/V) диметилсульфоксид.
5. Способ по любому из пп.3 или 4, где линия клеток адаптирована к бессывороточной среде.
